WWW.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 

Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
-- [ Страница 1 ] --

ISSN 1999-9127

Государственное научное учреждение

«ИНСТИТУТ ГЕНЕТИКИ И ЦИТОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНОЙ АКАДЕМИИ НАУК БЕЛАРУСИ»

МОЛЕКУЛЯРНАЯ И ПРИКЛАДНАЯ

ГЕНЕТИКА

СБОРНИК НАУЧНЫХ ТРУДОВ

ТОМ 16

Издается с 2005 года

Выходит два раза в год

Минск

2013

УДК [577.21 + 575] (082) Молекулярная и прикладная генетика: сб. науч. тр. / Институт генетики и цитологии НАН Беларуси;

редколл.: А.В. Кильчевский (гл. ред.) [и др.]. – Минск: ГНУ «Институт гене тики и цитологии НАН Беларуси», 2013. – Т. 16. – 130 с. – ISSN 1999-9127.

В сборнике научных трудов публикуются обзорные и экспериментальные статьи в области молекулярной и прикладной генетики растений, микроорганизмов, животных, человека, отражающие исследования генетических процессов на молекулярном, клеточном, организменном и популяционном уровнях. Особое внимание уделяет ся наиболее актуальным проблемам геномики, генетической и клеточной инженерии. Публикуются результаты изучения генетических основ селекции растений, животных и микроорганизмов, разработки эффективных био технологий для сельского хозяйства, здравоохранения, охраны окружающей среды, биобезопасности.

Сборник предназначен для специалистов, работающих в области генетики, преподавателей, аспирантов и сту дентов ВУЗов биологического, сельскохозяйственного и медицинского профиля.

Редакционная коллегия:

А.В. Кильчевский – главный редактор, Л.В. Хотылева – зам. главного редактора;

К.У. Вильчук, С.И. Гриб, О.Г. Давыденко, А.Н. Евтушенков, А.П. Ермишин, Н.В. Павлючук, Н.В. Казаровец, А.И. Ковалевич, Г.И. Лазюк, В.А. Лемеш, С.А. Лихачев, Н.П. Максимова, С.Б. Мельнов, М.Е. Михайлова, И.Б. Моссэ, М.Е. Никифоров, В.Е. Падутов, В.Н. Решетников, Е.А. Сычева, В.В. Титок, И.П. Шейко, О.Н. Харкевич – члены редколлегии;

И.В. Широкая – ответственный секретарь.

УДК [577.21 + 575] (082) ISSN 1999- ГНУ «Институт генетики и цитологии НАН Беларуси», СОДЕРжАНИЕ Н.В. Никитченко, Е.В. Сечко, В.В. Хомич, А.М. Чичко, Р.И. Гончарова, А.В. Сукало, Н.И. Рябоконь Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите и в контрольных группах детей

С.С. Ниязова, Н.Н. Чакова, Е.П. Михаленко, Э.В. Крупнова, Н.В. Чеботарева, С.М. Комиссарова Влияние полиморфизма генов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы на выраженность клинических признаков гипертрофической кардиомиопатии

М.Д. Амельянович, П.М. Морозик, А.Л. Гончар, И.Б. Моссэ Генетические факторы риска развития метаболического синдрома

К.В. Жур, Л.А. Кундас, Н.И. Бышнев, Е.А. Лосицкий, П.Н. Малашевич, И.Б. Моссэ Молекулярно-генетический анализ гена HIF1A для оценки физической работоспособ ности спортсмена

В.С. Панкратов, О.Г. Давыденко Структура генофондов населения двух регионов Белорусского Полесья по маркерам Y-хромосомы и митохондриальной ДНК

С.И. Вакула, В.Н. Леонтьев, В.Г. Лугин, В.В. Титок, А.В. Кильчевский Обоснование оптимальных параметров модели сорта льна масличного для условий Республики Беларусь

О.Ю. Урбанович, П.В. Кузмицкая ПЦР-основанное клонирование гомолога генов HcrVf из генома сорта груши Память Яковлева

А.М. Свирщевская, О.М. Малышева, Л.В. Милько, О.Ч. Мазур, С.А. Мелентьева, И.С. Татур, А.В. Кильчевский Анализ вариантов митохондриальных генов atpA и atp6 у линий и гибридов сахарной свеклы (Beta vulgaris L.), возделываемых в Беларуси

Е.А. Волуевич Генетические подходы в селекции мягкой пшеницы на устойчивость к стеблевой ржавчине... Н.И. Дубовец, Е.А. Сычева, Л.А. Соловей, Т.И. Штык, Е.Б. Бондаревич, А.Ю. Носова Создание и оценка вторичного генофонда тритикале (х Triticosecale wittm.) для использова ния в селекции на короткостебельность и устойчивость к предуборочному прорастанию... С.В. Кубрак, Н.Б. Павловский, Л.В. Кухарева, В.В. Титок, Л.В. Хотылева Оценка генетической гетерогенности растений Calluna vulgaris и Arctostaphylos uva-ursi (семейства Ericaceae), перспективных для создания декоративных посадок

А.П. Ермишин Особенности использования метода ПЦР в реальном времени для детекции и количествен ного определения генетически модифицированных составляющих в продуктах питания....... О.Г. Бабак, Н.А. Некрашевич, А.М. Добродькин, И.Г. Пугачева, М.М. Добродькин, А.В. Кильчевский Использование ДНК-маркеров для изучения генетической изменчивости родительских форм гибридов томата (Solanum lycopersicum) и особенностей проявления гетерозиса...... К.К. Яцевич, Д.П. Бажанов Конструирование in vitro рекомбинантных штаммов-деструкторов симазина.................. Рефераты

Правила оформления статьи

Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

CONTENTS

N. Nikitchehko, E. Sechko, V. Chomich, A. Chichko, R. Goncharova, A. Sukalo, N. Ryabokon DNA damages and their repair at juvenile rheumatoid arthritis and in control groups of children... S. Niyazova, N. Chakova, E. Michalenko, E. Krupnova, N. Chebotareva, S. Komissarova Impact of genetic polymorphisms in the renin-angiotensin-aldosterone system on the expression of clinical signs of hypertrophic cardiomyopathy

M. Ameliyanovich, P. Marozik, A. Gonchar, I. Mosse Genetic risk factors for developing metabolic syndrome

K. Zhur, L. Kundas, N. Byshnev, Y. Lasitski, P. Malashevich, I. Mosse Molecular genetic analysis of HIF1A gene to test athlete performance

V. Pankratov, O. Davydenko Gene pools structure of the population of two regions of Byelorussian Polesie based on Y-chromosome and mitochondrial DNA markers

S. Vakula, V. Leontiev, V. Luhin, V. Titok, A. Kilcheuski Objectivation for optimal model parameters of flaxseed cultivar for conditions of Belarus....... O. Urbanovich, P. Kuzmitskaya PCR-based full-length cloning of HcrVf homolog from pear cv. ‘Pamyat Yakovleva’................ A. Svirshchevskaya, O. Malysheva, L. Milko, O. Mazur, S. Melentieva, I. Tatur, A. Kilcheuski Analysis of mitochondrial genes atpA and atp6 variants in sugar beet (Beta vulgaris L.) lines and hybrids grown in Belarus

E. Voluevich Genetic approaches in common wheat breeding for resistance to stem rust

N. Dubovets, Y. Sycheva, L. Solovey, T. Shtyk, Y. Bondarevich, A. Nosova Development and assessment of secondary gene pool of triticale (x Triticosecale Wittm.) for use in breeding for semidwarfness and resistance to pre-harvest sprouting

S. Kubrak, N. Pavlovsky, L. Kukhareva, V. Titok, L. Khotyleva Genetic heterogeneity of plants promising for landscape gardening – Calluna vulgaris and Arctostaphylos uva-ursi (family Ericaceae)

A. Yermishin Peculiarities of using real time PCR method for detection and quantification of genetically modified components in food

Contents

O. Babak, N. Nekrashevich, A. Dobrodkin, I. Pugachova, M. Dobrodkin, A. Kilcheuski Use of DNA markers for studying genetic variability of parental forms in tomato hybrids (Solanum lycopersicum) and heterosis manifestation features

K. Yatsevich, D. Bazhanov Designing in vitro of recombinant strains-destructors by simazine

Summaries

Instructions to authors

Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

УДК 577.21:575:616.71/.72-002. Н.В. Никитченко1, Е.В. Сечко2, В.В. Хомич2, А.М. Чичко3, Р.И. Гончарова1, А.В. Сукало3, Н.И. Рябоконь

ПОВРЕжДЕНИЯ ДНК И ИХ РЕПАРАЦИЯ ПРИ ЮВЕНИЛЬНОМ

РЕВМАТОИДНОМ АРТРИТЕ И В КОНТРОЛЬНЫХ ГРУППАХ ДЕТЕЙ

Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, УО «Белорусский государственный медицинский университет», 1-я кафедра детских болезней Ревматоидные заболевания являются ши роко распространенными, в том числе среди детского населения. Ювенильный (юноше ский) ревматоидный артрит (ЮРА) занимает доминирующие позиции в количественном выражении среди детских аутоиммунных за болеваний и встречается со средней частотой 1–4 случая на 1000 детей [1, 2]. ЮРА харак теризуется воспалительными и аутоиммун ными реакциями с тяжелыми последствиями, приводящими к частичной или полной потере трудоспособности и даже летальному исходу.

Имеется большое количество данных о повы шенных уровнях повреждений ДНК в лимфо цитах периферической крови взрослых паци ентов с ревматоидным артритом. В частности, установлена высокая частота окислительных повреждений ДНК [3, 4], однонитевых и двуни тевых разрывов ДНК [5] как в клетках синови альной жидкости [4], так и в лимфоцитах пери ферической крови [3, 5]. В большинстве работ предполагается, что регистрируемые повреж дения ДНК индуцированы активными форма ми кислорода и азота (АФК или ROS – reactive oxygen species), вызывающими окислительный стресс клеток в результате заболевания. Тем са мым повреждениям ДНК отводится вторичная роль по отношению к заболеванию, т.е. повреж- при изучении лимфоцитов крови пациентов с дения ДНК являются следствием ревматоид- диагнозом ЮРА и с другими ревматоидными ных заболеваний. Высказывается также мнение заболеваниями – системной красной волчанкой о том, что повреждения ДНК могут участвовать в патогенезе ревматоидных заболеваний, в ре зультате которых наблюдается возникновение или усиление воспалительных процессов с вы делением АФК. Таким образом, предполагает ся, что повреждения ДНК являются первичны- с использованием ряда (9-ти) тестов, включая ми факторами (триггерами) ревматоидных нейтральную версию метода ДНК-комет [11].

Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите...

Таким образом, весьма ограниченное ко личество работ о повреждениях ДНК и про блемах их репарации у пациентов с ЮРА сви детельствует о необходимости расширения исследований в данном направлении с фунда ментальными и прикладными целями.

Основной целью представленной работы бы ло изучить уровни повреждений ДНК и их ре парацию в лимфоцитах периферической крови пациентов с диагнозом ЮРА и в контрольных Формирование исследуемых групп прове дено на базе УЗ «2-я городская детская кли ническая больница». От родителей каждого участника исследований получено инфор мированное согласие и заполненная анкета, формы которых утверждены Этическим коми тетом УО «2-я городская клиническая больни ца». Общее количество доноров в сформиро ванных группах составило 179 человек.

В группы исследований включены доноры обоих полов детской возрастной категории (от 1 года до 17 лет). При формировании групп исключалось любое сопутствующее заболева ние, особенно сопряженное с воспалительны ми и аутоиммунными реакциями. Велся кон троль возможного мутагенного воздействия (флюорографическое или рентгенологическое обследование, курение, алкоголь и др.).

Основную группу исследования составили пациенты с диагнозом ЮРА, включая различ ные подтипы данного заболевания (юноше ский олигоартрит и полиартрит, а также юно шеский артрит с системным началом).

Для исключения влияния базисной терапии на ДНК и ее репарацию из основной группы с ЮРА отдельно была выделена подгруппа пациентов с базисной терапией препаратами цитостатического и иммунодепрессивного действия (метотрексат и циклоспорин).

Доноры без базисного лечения также были выделены в отдельную подгруппу. Ее соста вили пациенты, не получавшие ранее меди каментозного лечения по поводу ЮРА, или получавшие лечение нестероидными противо воспалительными средствами (НПВС) в со четании (или без) с глюкокортикостероидами и слабыми антибиотиками, а также пациенты после длительного периода (от 6 месяцев до 3 лет), прошедшего после базисного лечения.

Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите... ного микроскопа Olympus BX51 с фильтром U-MWIB3 (длина волны возбуждения 470– nm, длина волны свечения 510 nm) и увеличе нием 400 [12]. Данный метод позволяет по- pus BX51 с фильтром U-MWG2 (длина волны лучить дифференциальную окраску и прово дить идентификацию живых, некротических и апоптотических клеток. У всех доноров, взятых в исследование, количество нежизнеспособных (некротических и апоптотических) клеток не превышало нормальные уровни (4%), харак терные для лимфоцитов периферической крови.

Для оценки уровней спонтанных и индуци рованных повреждений ДНК применен с не которыми модификациями стандартный про токол щелочной версии метода ДНК-комет, описанный N.P. Singh с соавторами [13]. Для изучения ответа лимфоцитов доноров на мута генное воздействие (оценка чувствительности, скорости и эффективности репарации ДНК) вы бран модельный мутаген пероксид водорода, являющийся одним из основных индукторов окислительного стресса в живых клетках и в ор- парации, выраженная в процентах;

ганизме в целом [14]. Использовались условия обработки пероксидом водорода, широко апро- ный уровень повреждений ДНК, регистри бированные нами ранее на различных клетках руемый соответственно на 0 и на 180 мин крови человека in vitro, включая лимфоциты репарации;

взрослых доноров [15–17]. А именно, концен трация пероксида 100 мкМ, продолжительность (фоновый) уровень повреждений ДНК, обработки клеток in vitro 1 мин при 4 °С, от- регистрируемый соответственно на 0 и на мывка от пероксида в течение последующих 5 180 мин репарации.

мин при 4 °С, включая 3 мин осаждения клеток Статистический анализ данных проведен в в микроцентрифуге с охлаждением. Инкубация пакете прикладных программ Statistics. Для клеток для восстановления после обработки каждой группы исследований рассчитаны сред пероксидом проводилась в микропробирках ние значения и стандартные отклонения. Срав в среде RPMI-1640 с добавлением 10% FBS в нительный анализ групп исследования прове течение 180 мин при 37 °С. Для изучения кине тики и скорости репарации повреждений ДНК Проведены также корреляционный, регресси выбраны следующие временные интервалы: онный и дисперсионный анализы данных. Для 0, 15, 30, 60, 120 и 180 мин после обработки регрессионного анализа использованы стан мутагеном [15–17]. Анализ клеток на наличие дартные и заданные пользователем функции.

Полученные нами данные по контрольной группе (популяционный, негативный контроль, табл. 1) свидетельствуют о том, что спонтанные уровни повреждений ДНК в лимфоцитах пери ферической крови детей, проживающих на тер ритории Беларуси, находятся на низком уровне (в среднем ниже 1 усл.ед. при индивидуальной вариации в пределах 10-го и 90-го процентиля от 0 до 2 усл.ед). Зарегистрированные нами Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите...

аварии, где почвенное загрязнение составляло около 13–98 кБк/м2 137Cs [20], что оказывается в 3 и более раз выше доаварийной нормы даже на момент проведения исследований в 2003 г., т.е. спустя 17 лет после аварии. Исследуемые нами дети, включая контрольную группу, в по давляющем большинстве являются жителями Минска или Минской области, т.е. проживают на относительно чистой территории.

Уровни спонтанных повреждений ДНК, за регистрированные нами в контрольной группе детского населения Беларуси, являются также более низкими по сравнению с контрольными взрослыми донорами из той же популяции.

Так, ранее было показано, что средние спон танные уровни повреждений ДНК в лимфо цитах контрольных групп доноров взрослой Уровни повреждений ДНК и показатели ее репарации в группе Контроль (все доноры) с диагнозом дисфункция соматические – время, необходимое для репарации 50% индуцированных повреждений ДНК.

При оценке влияния пола на исследуемые признаки (табл. 1) обнаружена статистиче ски незначимая (тест t-Стьюдента) тенденция ных заболеваний, но с различными диагнозами более высоких уровней повреждений ДНК у мальчиков по сравнению с девочками. Много факторный дисперсионный анализ не выявил влияния пола ребенка (P 0,6) на уровни спон танных и индуцированных повреждений ДНК.

Поскольку абсолютно здоровых детей почти нет, то для наших исследований был выбран Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите... ше предположение о корректности включения ДНК после индукции пероксидом водо в контроль и объединения в одну группу детей рода и регистрируемые на 0–180 мин ре разного пола и с нарушениями, не сопровожда- парации);

ющимися аутоиммунными и воспалительными заболеваниями, характерными для ЮРА. щий количество индуцированных повреж В рамках представленной работы впервые дений ДНК (0 мин репарации);

проведено изучение кинетики репарации ДНК в лимфоцитах детей. Регрессионный анализ репарации повреждений ДНК, индуцирован- щий скорость репарации;

ных пероксидом водорода, показал, что экс поненциальная функция, используемая нами щий нерепарированные повреждения ранее по аналогии с работой [23] для описания ДНК, т.е. оставшиеся после индукции пе кинетики репарации ДНК в различных крове- роксидом водорода на 180 мин репарации.

творных линиях клеток человека, а также в Пример обычного графического изображе лимфоцитах взрослых доноров [15–17], хоро- ния кинетики репарации ДНК с использова шо описывает кинетику репарации в лимфоци- нием заданной функции в пакете прикладных тах детей после обработки in vitro пероксидом программ “Statistics” представлен на рисун водорода. Функция имеет следующий вид: ке. Аналогичная картина получена для всех где y – количество индуцированных повреж- ДНК, индуцированных в лимфоцитах перифе дений ДНК в момент t (повреждения рической крови детей in vitro.

индуцированных 100 мкМ Н2О2 в лимфоцитах периферической крови детей in vitro.

С использованием данной функции для каждого донора была рассчитана скорость репарации по вреждений ДНК как время, необходимое на репа рацию первых 50% повреждений, индуцирован ных пероксидом водорода. Результаты расчетов, представленные в табл. 1, свидетельствуют о вы сокой скорости репарации ДНК в лимфоцитах де Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите...

Пациенты с диагнозом реактивный артрит со ставили группу позитивного контроля для ЮРА.

Эта группа, имеющая воспалительные процессы в суставах, характеризовалась более высокими Уровни повреждений ДНК и показатели ее репарации у пациентов с ЮРА Контроль (все доноры) Реактивный ар позитивный) терапии) терапией) – время, необходимое для репарации 50% индуцированных повреждений ДНК.

* – P 0,05, ** и *** – соответственно P 0,01 и P 0,001 по сравнению с негативным контролем.

– P 0,05 по сравнению с реактивным артритом (критерий t-Стьюдента).

Однако максимальные уровни повреждений ДНК в нашем исследовании были обнаружены у пациентов с диагнозом ЮРА (табл. 2). Так, средний уровень спонтанных повреждений ДНК в подгруппе ЮРА без базисного лечения был в 5,2 и 2,4 раза выше, чем соответственно в негативном и позитивном контроле. Средний уровень индуцированных повреждений ДНК был соответственно выше в 1,4 и 1,2 раза. У пациентов из этой подгруппы была также за фиксирована более низкая (в среднем на 21% и 37%) по сравнению с контрольными группа ми скорость репарации ДНК (табл. 2). Следует подчеркнуть, что пациенты с ЮРА в этой под группе не получали медикаментозного лечения или только НПВС, глюкокортикостероиды и слабые антибиотики, т.е. такие же медикамен тозные препараты, как и в группе позитивного контроля. Тем не менее, у пациентов с ЮРА Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите... Сравнительный анализ данных двух подгрупп процессами ассоциирована с установленным с диагнозом ЮРА - без базисного лечения и с нарушением (снижением скорости) репарации базисным лечением - показал тенденцию воз- ДНК. Это предположение касается системы можного влияния цитостатиков в сторону умень- эксцизионной репарации оснований ДНК (base шения спонтанного уровня повреждений ДНК и excision repair – BER), поскольку повреждения снижения скорости и эффективности репарации ДНК, индуцированные окислительным стрес ДНК (табл. 2). Однако имеющиеся у нас неболь- сом (главным образом, окислительные повреж шие выборки пациентов с ЮРА не позволили дения оснований и нитевые разрывы ДНК), вос выявить статистически значимые различия между станавливаются с участием BER [24–26].

этими подгруппами и тем самым определить эф- Результаты проведенных исследований сви фекты базисного лечения. В тоже время обнару- детельствуют о неблагоприятном состоянии жены общие для этих двух подгрупп тенденции генома у пациентов с диагнозом ЮРА. Они эффекта заболеваемости на исследуемые показа- также могут указывать на нестабильность ге тели, а именно увеличение уровней спонтанных нома у этой группы населения, если исполь и индуцированных повреждений ДНК и умень- зовать рекомендации, в которых принимаются шение скорости репарации. Это дает возмож- следующие критерии нестабильности генома:

ность объединять данные по всем пациентам с (i) повышенные фоновые уровни повреж диагнозом ЮРА (с и без базисного лечения), что дений ДНК, усиливает статистическую значимость результа- (ii) повышенная чувствительность к мута тов исследования и расширяет возможность их генному воздействию, использования (табл. 2, все пациенты с ЮРА). (iii) снижение эффективности репарации Таким образом, полученные нами данные о ДНК [21, 22, 27, 28].

повышенных уровнях спонтанных поврежде- При этом в качестве дополнительного кри ний ДНК в лимфоцитах периферической крови терия нестабильности генома, по-видимому, и о повышенной чувствительности этих клеток к мутагенному воздействию пероксидом водо рода подтвердили результаты, собранные на детей с ЮРА. И если повышенные уровни спон меньшей выборке пациентов с диагнозом ЮРА танных и индуцированных повреждений ДНК в работе Demirkaya с соавторами [9], упомяну- связаны с высокой концентрацией АФК в крови той выше. Помимо этого, нами установлено, что у пациентов с ревматоидными заболеваниями и скорость репарации ДНК при ЮРА снижается могут элиминироваться при нормальной работе в среднем на 21% по сравнению с негативным системы репарации, то низкая скорость репа контролем. Сравнительный анализ данных по рации является показателем дефекта системы ЮРА и реактивному артриту дает нам основа- эксцизионной репарации оснований ДНК и, ние полагать, что аутоиммунная природа ЮРА, таким образом, в наибольшей степени может возможно, в комплексе с воспалительными быть причиной дестабилизации генома.

Впервые для детской популяции Беларуси изучены уровни спонтанных и индуцированных повреждений ДНК. Описаны кинетика, эффек тивность и скорость репарации в лимфоцитах пе риферической крови доноров детской возрастной категории в норме (негативный контроль) и при патологии (при воспалительных и аутоиммунных реакциях). Установлено, что у пациентов с диа гнозом ЮРА наблюдаются повышенные уровни спонтанных и индуцированных повреждений ДНК, а также низкая скорость репарации ДНК.

Представленная работа проведена в рам ках задания 2.28 ГПНИ «Фундаментальные Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите...

1. Manners, P.J. Prevalence of juvenile chron ic arthritis in a population of 12-year-old children in urban Australia / P.J. Manners, D.A. Diepe veen // Pediatrics. – 1996. – Vol. 98. – P. 84–90.

2. 2011 American College of Rheumatology recommendations for the treatment of juvenile idiopathic arthritis: initiation and safety moni toring of therapeutic agents for the treatment of arthritis and systemic features / T. Beukel man [et al.] // Arthritis Care Res. (Hoboken). – 2011. – Vol. 63, № 4. – P. 465–482.

3. Oxidative DNA damage and cellular sen sitivity to oxidative stress in human autoimmune diseases / S. Bashir [et al.] // Ann. Rheum. Dis. – 1993. – Vol. 52, № 9. – P. 659–666.

4. Extracellular mitochondrial DNA and oxida tively damaged DNA in synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis / S. Haizadeh [et al.] // Ar thritis Res. Ther. – 2003. – Vol. 5, № 5. – R234–240.

5. Increased DNA strand breaks in mononu clear cells from patients with rheumatoid arthri tis / L.L. Bhusate [et al.] // Ann. Rheum. Dis. – 1992. – Vol. 51, № 1. – P. 8–12.

6. Karaman, A. Comet assay and analy sis of micronucleus formation in patients with rheumatoid arthritis / A. Karaman, D.N. Binici, M.A. Melicolu // Mutat. Res. – 2011. – Vol. 721, № 1. – P. 1–5.

7. The rheumatoid arthritis shared epitope in creases cellulr susceptibility to oxidative stress by antagonizing an adenosine-mediated anti-ox idative pathway / S. Ling [et al.] // Arthritis Res.

Ther. – 2007. – Vol. 9, № 1. – R5.

8. The Toll-like receptor gene family is in tegrated into human DNA damage and p53 net works / D. Menendez [et al.] // Plos Genetics. – 2012. – Vol. 7, № 3. – e1001360.

9. Genotoxicity of anti-tumor necrosis factor therapy in patients with juvenile idiopathic arthri- internal contamination caused by the Chernobyl tis / E. Demirkaya [et al.] // Arthritis Care Res. accident / O. Garcia, T. Mandina // Mutat. Res. – (Hoboken). – 2010. – Vol. 62, № 1. – P. 73–77. 2005. – Vol. 565. – P. 191–197.

10. Delayed repair of DNA damage by ioniz- 21. Chromosomal instability at the 7q11. ing radiation in cells from patients with juvenile region impacts on DNA damage response in systemic lupus erythematosus and rheumatoid lymphocytes from Williams-Beuren syndrome arthritis / D. McCurdy [et al.] // Radiat. Res. – patients / N.V. Savina [et al.] // Mutat. Res. – 11. Defective DNA double-strand break re- 22. Biomarkers of genome instability in some pair in pediatric systemic lupus erythematosus / genetic disorders: a pilot study / N.V. Savina R.C. Davies [et al.] // Arthritis Rheum. – 2012. – [et al.] // Biomarkers. – 2012. – Vol. 17, № 3. – Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

Н.В. Никитченко и др. Повреждения ДНК и их репарация при ювенильном ревматоидном артрите... 23. Radiation-induced DNA damage and its repair in lymphocytes of paients with head and neck cancer and healthy donors / O. Palyvoda [et al.] // Anticancer Res. – 2002. – Vol. 22. – P. 1721–1726.

24. Slupphaug, G. The interacting pathway for prevention and repair of oxidative DNA damage / G. Slupphaug, B. Kavli, H.E. Krokan // Mutat. Res. – 2003. – Vol. 531. – P. 231–251.

25. Dizdaroglu, M. Base excision repair of oxidative DNA damage by DNA glycosylases / M. Dizdaroglu // Mutat. Res. – 2005. – Vol. 591.– P. 45–59.

26. Oxidative DNA damage repair in mamma УДК 575.174.015.3:616.127-007. С.С. Ниязова1, Н.Н. Чакова1, Е.П. Михаленко1, Э.В. Крупнова1, Н.В. Чеботарева1, С.М. Комиссарова

ВЛИЯНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ РЕНИН-АНГИОТЕНЗИН

АЛЬДОСТЕРОНОВОЙ СИСТЕМЫ НА ВЫРАжЕННОСТЬ

КЛИНИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ

ГИПЕРТРОФИЧЕСКОЙ КАРДИОМИОПАТИИ

Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, ГУ «Республиканский научно-практический центр «Кардиология», Республика Беларусь, 220036, г. Минск, ул. Р. Люксембург, Гипертрофическая кардиомиопатия (ГКМП) – тяжелое первичное заболевание миокарда, ха рактеризующееся локальной гипертрофией ми окарда желудочка, развитием нарушений ритма и высоким риском внезапной смерти. Частота встречаемости данной патологии среди населе ния колеблется от 0,05 до 0,2% в разных попу ляциях [1]. Наиболее частой причиной развития заболевания являются мутации в генах, кодиру ющих синтез сократительных белков миокарда.

При этом у пациентов с одинаковыми мутация ми наблюдаются существенные различия в кли нических проявлениях заболевания. Этот фено мен объясняют влиянием генов-модификаторов, которые не являются причиной развития дан ной патологии, но оказывают влияние на сте пень выраженности клинических признаков ГКМП, в первую очередь, на выраженность гипертрофии левого желудочка. К таким генам модификаторам относят гены, кодирующие бел В исследование включили 249 пациентов с ГКМП (164 мужчины и 85 женщин, средний возраст 47,5 ± 13,4 лет), проходивших обсле дование и лечение в РНПЦ «Кардиология».

На базе РНПЦ «Кардиология» оценивали кли ническую картину заболевания, определяли эхокардиографические параметры, характе ризующие размеры миокарда левого желу дочка (толщину миокарда межжелудочковой перегородки (ТМЖП) и задней стенки левого желудочка (ТЗС ЛЖ), массу миокарда левого желудочка (ММ ЛЖ), индекс массы миокар да (ИММ), наличие обструкции выносящего тракта ЛЖ (ВТЛЖ)), а также анализирова ли показатели суточного мониторирования Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

С.С. Ниязова и др. Влияние полиморфизма генов ренин ангиотензин-альдостероновой системы... стрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ ана- [6–9] и эндонуклеазы представлены в табл. 1.

лиз). I/D-полиморфизм гена АСЕ определяли Праймеры синтезировались ОДО «Праймтех», с использованием метода ПЦР, в ходе которой г. Минск. ПЦР проводили на амплификаторе возможен синтез двух фрагментов, разница MyCyclerTM Termal cycler (BIORAD).

между которыми составляет 287 п.о., что соот- Продукты рестрикции фракционировали в ветствует размеру инсерции. Последователь- агарозном геле с бромистым этидием и визуа ности использованных в работе праймеров лировали в УФ-свете (см. рис.).

Последовательность праймеров и характеристика аллелей

M AA AA GG GA GA GA AA AA

M ID DD DD ID DD

M TT TT TT CC CT CT

AA AC AA AA AC AC AA CC M

Рис. Электрофореграмма фрагментов после: а – амплификации полиморфных аллелей гена АСЕ;

б – рестрикции гена CMA1;

в – рестрикции гена AGTR1;

г – рестрикции гена CYP11B С.С. Ниязова и др. Влияние полиморфизма генов ренин ангиотензин-альдостероновой системы...

Статистическая обработка полученных дан ных проводилась с использованием программ ного пакета “Statistica for Windows 6.0”. Срав нение несвязанных между собой групп по количественным признакам осуществлялось непараметрическим методом с использовани ем U-критерия Манна-Уитни. Данные в табли Мутации в генах, кодирующих белки сарко мера, действие которых может усугубляться полиморфизмом генов-модификаторов, вле кут за собой рост массы миокарда и развитие выраженной гипертрофии, которая является патоморфологическим признаком ГКМП. При ГКМП происходит утолщение преимуще ственно левого желудочка и межжелудочковой перегородки. Наиболее значимым методом диагностики ГКМП является эхокардиогра фическое исследование сердца, позволяющее Средние эхокардиографические структурно-функциональные показатели миокарда CMA AGTR CYP11B П р и м е ч а н и е : цифрами обозначены значимые различия, Р 0,05: 1 – между группами с генотипами II и ID (ACE);

2 – между группами с генотипами AA и GA (CMA1);

3 – между группами с генотипами AA и GG (CMA1), 4 – между группами с генотипами AA и AC (AGTR1) Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

С.С. Ниязова и др. Влияние полиморфизма генов ренин ангиотензин-альдостероновой системы... Ген АСЕ кодирует ангиотензинпревращаю щий фермент, который катализирует превраще ние неактивного ангиотензина I в ангиотензин II. В данном гене описано более 160 полимор физмов [10]. Особый интерес для исследований представляет I/D-полиморфизм 16 интрона, обусловленный наличием Alu-повтора длиной 287 п.н. (I-insertion) или его отсутствием (D deletion). Отмечена связь I/D-полиморфизма с уровнем ангиотензин-превращающего фермен та в плазме и некоторых тканях, прежде всего в миокарде: у лиц, гомозиготных по аллелю D, содержание фермента увеличено почти в два раза по сравнению с гомозиготными носите лями аллеля I [11]. Гетерозиготный генотип характеризуется промежуточным значением уровня ангиотензин-превращающего фермента.

Показано, что полиморфизм I/D гена АСЕ влия ет на выраженность клинических проявлений различных сердечно-сосудистых заболеваний, однако результаты исследований достаточ но противоречивы. Некоторые исследователи установили связь между полиморфизмом гена АСЕ и гипертрофией левого желудочка [3, 12], в то время как другие такой взаимосвязи не выявили [2, 13]. Также обсуждается роль по лиморфизма гена АСЕ в развитии фиброза при ГКМП, который играет важную роль в станов лении диастолической дисфункции при этом заболевании [14].

В нашем исследовании при анализе степени выраженности эхокардиографических пока зателей в зависимости от I/D-полиморфизма гена АСЕ (табл. 2) было обнаружено, что по казатели ТМЖП, ММ ЛЖ и ИММ значимо не различались, за исключением показателя ТЗС ЛЖ, который был значимо выше (Р = 0,013) у пациентов с генотипом ID по сравнению с но сителями генотипа II.

Ген CMA1 кодирует фермент химазу, от ветственный за альтернативный путь биосин теза ангиотензина II. Химаза обладает даже большей ферментативной активностью, чем ангиотензин-превращающий фермент. Экспе риментальные исследования показали, что в клетках сердца химаза определяет 75–80% син теза ангиотензина II. В 5’-нетранслируемой об ласти гена CMA1 обнаружена точечная замена аденина на гуанин в положении –1903. Показа но, что наличие аллеля G снижает образование ангиотензина II в эндотелии сосудов [15].

С.С. Ниязова и др. Влияние полиморфизма генов ренин ангиотензин-альдостероновой системы...

выносящего тракта ЛЖ: у пациентов с геноти пом АА она встречается статистически значимо чаще, чем у пациентов с генотипом АС. гена и гипертрофии миокарда. Результаты таких При изучении ассоциации 1166AС полимор- исследований оказались весьма противоречивы:

физм гена AGTR1 у пациентов с ГКМП со сте пенью выраженности показателей гипертрофии (табл. 2) нами была выявлена связь данного по лиморфизма с массой миокарда ЛЖ: у пациентов с генотипом АА масса миокарда ЛЖ была выше, зультатов при исследовании ГКМП может быть чем у носителей аллеля С, при этом достоверно частично объяснена популяционной гетероген (Р = 0,022) по сравнению с пациентами с гете розиготным генотипом АС. Полученные нами В проведенном нами исследовании не выяв результаты указывают на то, что фактором риска развития гипертрофии ЛЖ является генотип АА.

Ген СYP11B2 кодирует альдостеронсинтазу, телей гипертрофии миокарда (табл. 2).

которая катализирует три отдельных реакции превращения 11-дезоксикортикостерона в аль достерон. Идентифицировано семь полимор физмов данного гена. Наиболее изучен поли морфизм в 5'-конце этого гена – замена цитозина тимином в -344-й позиции, который приводит к изменению связывания с фактором транскрип ции SF-1 и, таким образом, может влиять на экспрессию гена [9]. Известно, что повышение активности фермента альдостеронсинтазы при водит к увеличению продукции альдостерона, который является стимулятором клеточной ги пертрофии и фиброза в сердечно-сосудистой системе. Ряд исследований продемонстрировал зависимость массы миокарда левого желудочка от уровня альдостерона в плазме [21]. Исходя из возможной зависимости уровня секреции альдостерона от полиморфизма гена СYP11B2 ния показателей ХМ ЭКГ у пациентов с ГКМП.

Значения электрокардиографических показателей у пациентов CMA Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

С.С. Ниязова и др. Влияние полиморфизма генов ренин ангиотензин-альдостероновой системы... AGTR CYP11B П р и м е ч а н и е : цифрами обозначены значимые различия, Р 0,05: 1 – между группами с генотипами II и ID (ACE);

2 – между группами с генотипами ID и DD;

3 – между группами с генотипами II и DD;

4 – между группами с генотипами СТ и ТТ (CYP11B2) В настоящее время большое внимание уде ляется прогностической роли длительности и дисперсии корригированного интервала (QT) как маркеров развития фатальных аритмий и внезапной сердечной смерти у больных с раз личной сердечно-сосудистой патологией [26].

Дисперсия интервала QT (QTcd) отражает негомогенность процессов реполяризации в миокарде, лежащую в основе его электриче ской нестабильности и вызывающую разви тие аритмий и внезапной сердечной смерти у пациентов с различной патологией. Механизм увеличения дисперсии QT при ГКМП до сих пор неясен. Некоторые исследователи пред полагают, что увеличение QTcd может быть связано с выраженностью гипертрофии ЛЖ [27], в то время как другие считают, что к уве личению дисперсии QT могут привести такие характерные особенности ГКМП, как фиброз и нарушение пространственной ориентации миофибрилл и кардиомиоцитов.

В нашем исследовании при оценке уровня среднего значения дисперсии корригированно го интервала в зависимости от генотипа АСЕ ми не выявлена.

Таким образом, в нашем исследовании было обнаружено влияние I/D-полиморфизма гена АСЕ, -1903AG полиморфизма гена CMA1 и с большей степенью выраженности ишеми 1166AС полиморфизма гена AGTR1 на вы раженность гипертрофии миокарда левого желудочка у пациентов с гипертрофической С.С. Ниязова и др. Влияние полиморфизма генов ренин ангиотензин-альдостероновой системы...

1. Амосова, Е.Н. Кардиомиопатии / Е.Н. Ам носова. – Киев: Книга плюс, 1999. – 213 с.

2. Role of candidate modifier genes of the phenotypic expression of hypertrophy in patients with hypertrophic cardiomyopathy / R. Brugada [et al.] // J.Investig Med. – 1997. – Vol. 45. – P. 542–551.

3. Angiotensin-converting enzyme geno types and left ventricular hypertrophy in patients with. hypertrophic cardiomyopathy / M. Le chin [et al.] // Circulation. – 1995. – Vol. 92. – P. 1808–1812.

4. Renin-angiotensin system gene polymor physms and left ventricular hypertrophy. The case against an association / M.P. West [et al.] // Adv. Exp. Med. Biol. – 1997. – Vol. 432. – P. 117–122.

5. Mathew, C.С. The isolation of high mo lecular weight eukaryotic DNA / C.С. Mathew // Methods Mol. Biol. – 1985. – Vol. 2. – P. 31–34.

6. Insertion-deletion polymorphism of the ACE gene modulates reversibility of endothelial dys function with ACE Inhibition / A. Prasad [et al.] // Circulation. – 2000. – Vol. 102. – P. 35–41.

7. 1166 A/C polymorphism of the angioten sin II type 1 receptor gene and the response to short-term infusion of angiotensin II / K.F. Hilg ers [et al.] // Circulation. – 1999. – Vol. 100. – P. 1394–1399.

8. Angiotensin-converting enzyme and heart chymase gene polymorphisms in hypertrophic cardiomyopathy // A. Pfeuter [et al.] // Am. J.

Cardiol. – 1996. – Vol. 78. – P. 362–364.

9. Associations between human aldosterone synthase (CYP11B2) gene polymorphisms and left ventricular size, mass, and function / M. Ku pari [et al.] // Circulation. – 1998. – Vol. 97. – giotensin-aldosterone system among 389 unre P. 569–575.

10. ACE polymorphisms / F.A. Sayed-Tabata baei [et al.] // Circulation Research. – 2006. – Vol. 98. – P. 1123–1133.

11. Полиморфизм ангиотензинпревращаю щего фермента и NO-синтазы у лиц с арте риальной гипертензией, гипертрофией лево го желудочка и гипертрофической кардио миопатей / В.А. Степанов [и др.] // Генетика. – 1998. – № 34. – С. 1578–1581.

12. The influence of the angiotensin I convert ing enzyme genotype in familial hypertrophic cardiomyopathy varies with the disease gene Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

С.С. Ниязова и др. Влияние полиморфизма генов ренин ангиотензин-альдостероновой системы... 22. Dzau, V.J. Cell biology and genetics of an giotensin in cardiovascular disease / V.J. Dzau // J. Hypertens. – 1994. – Vol. 12. – P. S3–S10.

23. Endothelial nitric oxide synthase gene is positively associated with essential hypertension / Y. Miyamoto [et al.] // Hypertension. – 1998. – Vol. 32. – P. 3–8.

24. Cardiac aldosterone in subjects with hy pertrophic cardiomyopathy / W. Chai [et al.] // J. Renin Angiotensin Aldosterone Syst. – 2006. – Vol. 7. – P. 225–230.

25. Гипертрофическая кардиомиопатия: сов ременные аспекты диагностики и лечения / В.В. Сыволап [и др.] // Запорожский УДК 616.1:616.

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РИСКА РАЗВИТИЯ

МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА

Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, Всемирная организация здравоохранения признала метаболический синдром (МС) но вой пандемией XXI века. В развитых странах каждый четвертый гражданин страдает дан ным недугом, и, согласно расчетам экспертов, в ближайшие годы будет происходить увели чение темпов роста заболеваемости [1]. Необ ходимо также подчеркнуть, что большинство пациентов с МС – это люди активного трудо способного возраста, т.е. наиболее продуктив ная и значимая часть общества. Кроме того, за последние два десятилетия изучаемый син дром демонстрирует устойчивый рост среди молодежи. Однако до сих пор МС не относят к разряду истинных заболеваний, поэтому он не включен в перечень Международной клас сификации болезней 10-го пересмотра.

Метаболический синдром – результат взаи модействия внешних факторов, образа жизни (диета, физическая активность, стресс, забота о здоровье и т.д.) с индивидуальными генети ческими особенностями.

Существует множество критериев опреде ления метаболического синдрома [2–4], наи более традиционным из которых является наличие минимум трех из следующих компо нентов [5]:

• центральное ожирение (окружность талии 102 см у мужчин, 88 см у женщин);

• нарушение регуляции глюкозы (уровень глюкозы в плазме натощак 110 мг/дл);

• артериальная гипертензия ( 130/85 мм рт. ст.);

• дислипидемия (уровень триглицеридов 150 мг/дл, уровень липопротеидов высокой плотности 40 мг/дл у мужчин, 50 мг/дл у женщин).

Другими компонентами, которые часто ас социированы с МС, являются повышенные уровни С-реактивного белка и ингибитора ак тиватора плазминогена, а также пониженный уровень плазменного адипонектина.

Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

М.Д. Амельянович и др. Генетические факторы риска развития метаболического синдрома небольшую часть среди МС, они обусловлены полностью наследственностью и не корректи руются профилактическими мерами.

Гораздо больший интерес в данном аспек те представляет МС, имеющий генетическую предрасположенность и развивающийся под влиянием средовых факторов. В этом случае гены проявляют себя лишь под действием предрасполагающих факторов, среди которых определяющее значение имеют особенности образа жизни, а именно гиподинамия и не сбалансированное питание с избыточным по ступлением калорий.

В связи с этим, все больше внимания ис следователи уделяют изучению молекулярно генетических факторов предрасположенности к МС и анализу ассоциации их полиморфиз мов с различными компонентами синдрома.

Для этого используют различные подходы, один из которых – анализ генов-кандидатов предрасположенности к МС.

Имеются сообщения об ассоциации МС с полиморфизмами генов, продукты которых вовлечены в метаболизм липопротеинов (гены APOA1, APOA5, CETP, LDLR) [10, 11], адре- но проводить мероприятия по профилактике нергическую передачу сигнала (гены ADRA1A, данного заболевания, а также правильно выби ADRB1, ADRB3) [12], синтез липидов и диф- рать методы лечения, существенно улучшить ференцировку адипоцитов (гены SCD1, LPIN1 прогноз и избежать возможных осложнений.

В исследовании были проанализированы образцы ДНК 126 человек с МС в возрасте от 20 до 84 лет (средний возраст 53,03 ± 14,98), 73 мужчины, 53 женщины, которые проходили обследование в Минском городском эндокринологическом центре. Контрольная группа состояла из случайной выборки жите лей города Минска и включала 362 человека.

Выделение ДНК из клеток буккального эпи телия и лейкоцитов периферической крови проводили с помощью классической фенол хлороформной экстракции [22]. Данный метод обладает хорошей воспроизводимостью, спо собен обеспечить высокую степень чистоты ДНК, полученные этим методом образцы ста бильны и могут храниться длительное время.

Исследования проводили с использованием амплификатора Applied Biosystems™ Thermal Cycler 2720 (BIO-RAD, США), а также системы ляет определить генотип образца одновременно детекции продуктов ПЦР в реальном времени М.Д. Амельянович и др. Генетические факторы риска развития метаболического синдрома зондов возрастает пропорционально росту коли чества копий участка исследуемого гена. Каж дый краситель флуоресцирует в определенном спектре, что позволяет сделать заключение о генотипе исследуемого образца.

Последовательность ПЦР-праймеров, использованных для определения Статистическую обработку полученных дан- меняли коэффициент соотношения шансов (OR).

ных проводили с помощью стандартного крите- Распределение соответствующих генотипов в рия 2, для редких генотипов расчет проводился с исследуемых группах для всех проанализирован учетом поправки Йетса. Для оценки влияния по лиморфизмов на риск развития заболевания при Для проведения молекулярно-генетического анализа нами были выбраны гены, оказываю щие влияние на различные компоненты мета болического синдрома.

Ген ACE кодирует аминокислотную после довательность ангиотензин-превращающего фермента (АПФ), который является важ ным физиологическим регулятором арте Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

М.Д. Амельянович и др. Генетические факторы риска развития метаболического синдрома кой АПФ, что является фактором риска ар териальной гипертензии и других сердечно сосудистых заболеваний.

Ген TCF7L2 кодирует транскрипционный Ген разобщающего белка 2 (UCP2) принадле фактор, который является составной частью сигнального пути Wnt. Данный сигнальный ных белков, разобщающих окислительное фос путь задействован в регуляции механизмов роста, развития и функционирования различ ных клеток, в том числе и - клеток поджелу дочной железы [24]. Связь полиморфизма С/T гена TCF7L2 с развитием сахарного диабета даря своей активности, играет важную роль в 2 типа (СД 2) была подтверждена во многих ассоциативных исследованиях в популяциях разной этнической природы [25]. Было пока зано, что носительство генотипов с минорным аллелем увеличивает риск развития СД 2 типа в среднем в 1,5 раза [26]. Однако популяцион ные частоты в различных странах имели зна чительные различия.

Ген PPARG2 кодирует гамма рецепторы, ак- на) являются известными факторами риска тивируемые пролифераторами пероксисом.

Естественными лигандами этих рецепторов являются свободные жирные кислоты и эйко заноиды. После активации рецептор переме щается в клеточное ядро и активирует транс крипцию большого числа генов. Ген PPARG2 контрольной группы по анализируемым генам экспрессируется в жировой ткани и регулирует дифференцировку адипоцитов и генную экс прессию в адипоцитах. Кроме того, ген экс прессируется и в -клетках поджелудочной железы [27]. Поэтому, возможно, влияет на секрецию инсулина поджелудочной железой.

Распределение частот генотипов и аллелей изученных полиморфизмов полиморфизм аллели М.Д. Амельянович и др. Генетические факторы риска развития метаболического синдрома полиморфизм аллели PPARG Pro/Ala UCP Ala/Val * – различия статистически достоверны.

По результатам генотипирования выявлено статистически достоверное различие в рас пределении частот генотипов и аллелей поли морфизма I/D гена АСЕ среди пациентов с МС крецию адипокинов и инсулина [30].

и контрольной группой (2 = 4,49 и 2 = 4,36, соответственно, P 0,05). При этом наличие стотами генотипов и аллелей в исследованных генотипа D/D способствует увеличению ри ска заболевания в 1,33 раза, а частота аллеля риска D достоверно выше среди пациентов с ственно, P 0,01). В связи с низкой частотой МС по сравнению с контролем (OR = 1,36 95% Взаимосвязь полиморфизма I/D гена ACE с T/C: среди пациентов с МС частота этого ге уровнем артериального давления хорошо из- нотипа значительно выше, чем в контрольной учена и считается доказанной. Показано, что группе (44,4% и 27,9% соответственно). В то уровень циркулирующего в крови ангиотензин превращающего фермента у носителей D/D ге- (OR = 0,49 95% CI 0,32–0,74). Полученные нотипа был в 2 раза выше, чем у I/I индивидуу- данные свидетельствуют о значительном вкла мов, у I/D индивидуумов был промежуточный де полиморфизма C/T гена TCF7L2 в патогенез уровень [21]. В то же время объяснить взаимо- развития МС.

связь данного полиморфизма с развитием МС Проведенный Yu Tong1 et al. мета-анализ только его влиянием на уровень артериального подтвердил достоверную связь данного поли давления не представляется возможным. Ве- морфизма, как с артериальной гипертензией, роятно, полиморфизм I/D гена ACE оказывает так и с сахарным диабетом [31], поэтому выяв Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

М.Д. Амельянович и др. Генетические факторы риска развития метаболического синдрома ление полиморфизма C/T гена TCF7L2 может генотип Ala/Val, по-видимому, является про служить важным прогностическим фактором текторным (OR = 0,64 95% CI 0,42–0,96).

при определении риска развития МС. Исследования физиологической роли белка Статистически достоверных различий в распределении частот генотипов и аллелей в процессе окисления жирных кислот, регуля полиморфизма Pro12Ala гена PPARG2 в ис- ции работы -клеток поджелудочной железы, следованных группах нами не выявлено, ча- а также влияет на пищевое поведение инди стота аллеля Ala в контрольной группе была видуума. Таким образом, исследование взаи не намного выше, чем в группе с МС. По ли- мосвязи полиморфизмов и мутаций генов, ас тературным данным [32], частота гетерозигот социированных с данным белком, с развитием в популяциях европейского типа достигает МС является весьма перспективным.

20%, гомозиготных носителей генотипа Ala/ Как показали полученные нами результаты, Ala – около 2%, что вполне соотносится с дан- не наблюдается статистически достоверного ными, полученными в нашем исследовании. отличия в распределении частот генотипов и Проведенный Gouda H.N. et al. мета-анализ, аллелей среди пациентов с МС и контролем по включающий исследование более чем 30 000 обоим полиморфизмам генов системы свер человек, показал протективный эффект на личия 12Ala аллеля в генотипе. Этот эффект ленная нами частота встречаемости мутации включал не только предупреждение развития СД2, но и большую чувствительность к инсу- ветствует среднеевропейской частоте, опи лину, то есть предупреждение развития инсу- санной в литературе [33]. Исследование по линорезистентности, что особенно проявля- лиморфизмов и мутаций генов, оказывающих лось у лиц с ожирением [32]. влияние на реологические свойства крови, у При анализе результатов генотипирования лиц с МС необходимо проводить с целью про по полиморфизму Ala/Val гена UCP2 нами гнозирования и предотвращения возможных наблюдалось статистически достоверное уве- осложнений в виде тромбозов и тромбоэмбо личение частоты гомозигот Ala/Ala (OR = 1,70 лий. Именно изменения в системе гемостаза и 95% CI 1,10–2,61) среди пациентов с МС по фибринолиза при метаболическом синдроме, сравнению с контролем (c2 = 6,48, P 0,05). по мнению некоторых исследователей, явля При анализе распределения аллелей по этому полиморфизму не было выявлено статистиче ски достоверной зависимости. В то же время По результатам проведенного исследования, наибольшим вкладом в генетическую предрас положенность к метаболическому синдрому из проанализированных генов обладают TCF7L2, ского синдрома для проведения своевременных ACE и UCP2. Генетическое тестирование по превентивных мероприятий, а также более эф этим генам можно проводить с целью форми рования среди населения групп повышенного риска развития данного заболевания. В то же время, представляет интерес более подроб ное изучение тех генов, которые в данном ис следовании не показали ассоциации с риском развития МС.

1. Zimmet, P. Preventing type 2 diabetes and the medicine. – 2003. – Vol. 20, № 9. – P. 693–702.

dysmetabolic syndrome in the real world: a realistic view / P. Zimmet, J. Shaw, G. Alberti // Diabetic. Geneva: World Health Organization, 1999. – 136 p.

М.Д. Амельянович и др. Генетические факторы риска развития метаболического синдрома 3. Balkau, B. Comment on the provisional report from the WHO consultation. Europe an Group for the Study of Insulin Resistance (EGIR) / B. Balkau, M.A. Charles // Diabetic Medicine. – 1999. – Vol. 16, № 5. – P. 442–443.

4. The metabolic syndrome – a new world wide definition / K.G. Alberti [et al.] // Lancet. – 2005. – Vol. 366, № 9491. – P. 1059–1062.

5. Diagnosis and management of the meta bolic syndrome: an American Heart Association/ National Heart, Lung, and Blood Institute Scien tific Statement / S.M. Grundy [et al.] // Circula tion. – 2005. – Vol. 112, № 17. – P. 2735–2752.

6. Heritabilities of the metabolic syndrome phenotypes and related factors in Korean twins / J. Sung [et al.] // Journal of Clinical Endocrinol ogy and Metabolism. – 2005. – Vol. 94, № 12. – P. 4946–4952.

7. McCarthy, J.J. Evidence for substantial effect modification by gender in a large-scale genetic association study of the metabolic syn drome among coronary heart disease patients / J.J. McCarthy, J. Meyer, D.J. Moliterno // Hum Genet. – 2003. – Vol. 114. – P. 87–98.

8. A mutation in the human leptin receptor gene causes obesity and pituitary dysfunction / K. Clement [et al.] // Nature. – 1998. – Vol. 392, № 6674. – P. 398–401.

9. A frameshift mutation in human MC4R is associated with a dominant form of obesity / C. Vaisse [et al.] // Nature Genetics. – 1998. – Vol. 20, № 2. – P. 113–114.

10. Dominant negative mutations in human PPAR gamma associated with severe insulin resistance, diabetes mellitus and hypertension / I. Barroso [et al.] // Nature. – 1999. – Vol. 402, № 6764. – P. 880–883.

11. Genetic risk for metabolic syndrome: ex amination of candidate gene polymorphisms related to lipid metabolism in Japanese people / Y. Yamada [et al.] // Journal of Medical Genet ics. – 2008. – Vol. 45, № 1. – P. 22–28.

12. Genetic variants and the metabolic syn drome: a systematic review / C.M. Povel [et al.] // Obesity Reviews. – 2011. – Vol. 12, № 11. – P. 952–967.

13. Association between ADRA1A gene and the metabolic syndrome: candidate genes and functional counterpart in the PAMELA popula tion / G. Grassi [et al.] // Journal of Hyperten sion. – 2011. – Vol. 29, № 6. – P. 1121–1127.

Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

М.Д. Амельянович и др. Генетические факторы риска развития метаболического синдрома 26. Campbell, A.I. The effect of some latent virus infections of the growth and cropping ap ples / A.I. Campbell // Journal of Horticultural Sciences. – 1963. – Vol. 38. – P. 15–19.

27. The PPARgamma Pro12Ala variant is associated with insulin sensitivity in Russian normoglycaemic and type 2 diabetic subjects / D.A. Chistiakov [et al.] // Diab. Vasc. Dis. Res. – 2010. – Vol. 7, № 1. – P. 56–62.

28. Structural organization and mutational analysis of the human uncoupling protein- (hUCP2) gene / N. Tu [et al.] // Life Sci. – 1999. – Vol. 64. – P. 41– 29. The common 866G/A polymorphism in the promoter region of the UCP-2 gene is associ ated with reduced risk of type 2 diabetes in Cau casians from Italy / A. Bulotta [et al.] // J. Clin.

End. Metab. – 2005. – Vol. 90. – P. 1176–1180.

30. Engeli, S. Role of the renin-angiotensin aldosterone systemin the metabolic syndrome / S. Engeli // Contrib. Nephrol. – 2006. – Vol. 151. – P. 122–134.

31. Association between TCF7L2 gene poly morphisms and susceptibility to Type 2 Diabetes УДК 577.21: К.В. Жур1, Л.А. Кундас1, Н.И. Бышнев1, Е.А. Лосицкий2, П.Н. Малашевич2, И.Б. Моссэ

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ГЕНА HIF1A ДЛЯ

ОЦЕНКИ ФИЗИЧЕСКОЙ РАБОТОСПОСОБНОСТИ СПОРТСМЕНА

Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, Для подготовки спортсменов высшей ква лификации затрачиваются огромные средства.

Проводятся динамические функциональные обследования спортсменов, позволяющие опре делить соответствие тренировочных нагрузок функциональным возможностям организма, разрабатываются индивидуальные планы ме дицинских мероприятий и фармакологического обеспечения. Кроме того, в систему комплекс ных лечебно-профилактических мероприятий для спортсменов национальных команд вклю чаются новые немедикаментозные методики, повышающие физическую работоспособность и степень адаптации к физическим нагрузкам (криотерапия, озонотерапия, нормобарическая гипоксическая тренировка и др.) [1].

Учреждениями спортивной медицины Респу блики Беларусь выявлено значительное количе ство спортсменов, нуждающихся в коррекции тренировочного процесса. По ряду националь ных команд общее количество спортсменов, нуждающихся в восстановительных мероприя тиях, доходило до 55%. По данным Республикан ского центра спортивной медицины, функцио нальная готовность спортсменов к XXX летним Олимпийским играм 2012 г. в Лондоне была ни же аналогичного периода 2008 г. [2]. Таким об разом, следует сделать вывод о недостаточности существующей системы подготовки спортсме нов и необходимости ее совершенствования.

Важнейшими и неотъемлемыми составляю щими успешной спортивной деятельности яв ляются физические и психологические способ ности человека, которые на 75–85% обусловлены наследственными факторами [3]. Практика под готовки спортсменов свидетельствует о том, что Проведено генетическое тестирование (марафон, биатлон, академическая гребля, 292 спортсменов различной специализации конькобежный спорт, велоспорт, хоккей, боль Молекулярная и прикладная генетика. Том 16, 2013 г.

К.В. Жур и др. Молекулярно-генетический анализ гена HIF1A для оценки физической работоспособности...

шой теннис, спортивная акробатика) и 268 че ловек контрольной группы.

В качестве биологического материала для исследования использовали ДНК и РНК, выде ленные из лейкоцитов периферической крови с помощью набора реагентов для экстракции соответственно РНК и ДНК (Синтол, Россия).

Генотипирование по полиморфизму C1772T многофакторной экспресс-диагностики теку HIF1A осуществляли методом количественной щего и оперативного состояния обобщенных ПЦР с использованием праймеров и TaqMan зондов собственного дизайна и набора реаген тов для проведения ПЦР в реальном времени (Синтол, Россия). Детекцию флюоресценции, а также первичную обработку результатов осуществляли программным обеспечением прибора CFX96, BIO-RAD (США) в автомати- сти вклада каждого аллеля гена в спортивную ческом режиме. Для оценки экспрессии гена HIF1A использовали технологию относитель Во всех исследованных группах распреде ление частот генотипов гена HIF1A соответ- атлетов таких видов спорта как теннис (98,3%, ствовало распределению Харди-Вайнберга.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |
 




Похожие материалы:

«ISSN 1999-9127 Государственное научное учреждение ИНСТИТУТ ГЕНЕТИКИ И ЦИТОЛОГИИ НАЦИОНАЛЬНОЙ АКАДЕМИИ НАУК БЕЛАРУСИ МОЛЕКУЛЯРНАЯ И ПРИКЛАДНАЯ ГЕНЕТИКА СБОРНИК НАУЧНЫХ ТРУДОВ ТОМ 12 Издается с 2005 года Выходит два раза в год Минск 2011 УДК [577.21 + 575] (082) Молекулярная и прикладная генетика: сб. науч. тр. / Институт генетики и цитологии НАН Беларуси; редколл.: А.В. Кильчевский (гл. ред.) [и др.]. — Минск: Право и экономика, 2011. — 154 с. — ISBN 978-985-442-581-8. В сборнике научных трудов ...»

«МОРДОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИСТОРИКО-СОЦИОЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ КАФЕДРА ЭКОНОМИЧЕСКОЙ ИСТОРИИ И ИНФОРМАЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ КРЕСТЬЯНИН В МИРУ И НА ВОЙНЕ Сборни материалов III Мер ш инс их на чных чтений Саранс Типо рафия Красный О тябрь 2005 УДК 316.3 ББК Т3(2Рос-Мор) К–271 Ответственный редактор – Н. М. Арсентьев Редакционная коллегия: В. М. Арсентьев, Э. Д. Богатырев, О. И. Марискин, К. И. Шапкарин, В. В. Щербаков Издание осуществлено за счет средств республиканского бюджета Республики ...»

«Океаны энергии 1 Augusta Goldin OCEANS OF ENERGY Reservoir of Power for the Future Harcourt Brace Jovanovich / New York and London Аугуста Голдин ОКЕАНЫ ЭНЕРГИИ Источники энергии будущего Перевод с английского И. Бочаровой Издательство Знание Москва, 1983 Аугуста Голдин 2 ББК 31.55 Г60 Аугуста Голдин Г60 Океаны энергии.– Пер. с англ.– М.: Знание, 1983.– 144 с, ил. 25 к. 50 000 экз. Книга посвящена промышленному использованию энергии, заключенной в океане. Автор рассказывает о приливных ...»

«Алматы, 2012 1 УДК 911 ББК 26.0 Выпущено по программе Издание социально-важных видов литературы Комитета информации и архивов Министерства культуры и информации Республики Казахстан. Алматинский областной филиал РОО Союз ученых Казахстана Институт Жетысу Рецензенты: д. и. н., профессор А.Н. Марьяшев, М. Акишев Ответственные редакторы: к.ф.н., профессор В.С. Верещагина Казахский текст: М. Акишев Составители: академик НАН РК, д. и. н., профессор К.М. Байпаков, член-корр. АГН РК, д. и. н., ...»

«0 НАУЧНОЕ СООБЩЕСТВО СТУДЕНТОВ XXI СТОЛЕТИЯ. ЕСТЕСТВЕННЫЕ НАУКИ Электронный сборник статей по материалам XVI студенческой международной заочной научно-практической конференции № 2 (16) Февраль 2014 г. Издается с сентября 2012 года Новосибирск 2014 УДК 50 ББК 2 Н 34 Председатель редколлегии: Дмитриева Наталья Витальевна — д-р психол. наук, канд. мед. наук, проф., академик Международной академии наук педагогического образования, врач-психотерапевт, член профессиональной психотерапевтической лиги. ...»

«БЮЛЛЕТЕНЬ НОВЫХ ПОСТУПЛЕНИЙ 2011 г. , 1 КВАРТАЛ 2012 г. Библиотека Иркутской государственной сельскохозяйственной академии Иркутск 2012 Содержание 1. Агрономический факультет. ………………………………………………….2 2. Инженерный факультет. ……………………………………………………….20 3. Общественные кафедры. …………………………………………………….…31 4. Факультет Биотехнологии и ветеринарной медицины………………………38 5. Факультет охотоведения. …………………………………………………….51 6. Экономический факультет. ……………………………………………………62 7. Энергетический ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ ФГБОУ ВПО КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ В. А. Попов Н. В. Островский АГРОКЛИМАТОЛОГИЯ И ГИДРАВЛИКА РИСОВЫХ ЭКОСИСТЕМ Монография Краснодар 2013 УДК 551.5:63:631.674:633.18:574 ББК 40.6 П58 Рецензенты: А. Ч. Уджуху – доктор сельскохозяйственных наук (Всероссийский научно-исследовательский институт риса); Т. И. Сафронова – доктор технических наук, профессор (Кубанский государственный аграрный университет) Попов В. А. П58 Агроклиматология и ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ ГЛАВНОЕ УПРАВЛЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ, НАУКИ И КАДРОВ УЧРЕЖДЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ БЕЛОРУССКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ АГРОПРОМЫШЛЕННОГО КОМПЛЕКСА Материалы XI Международной научной конференции студентов и магистрантов Научный поиск молодежи XXI века, посвященной 170-летию Белорусской государственной сельскохозяйственной академии (Горки 2-4 декабря 2009г.) Горки 2010 МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ...»

«АССОЦИАЦИЯ ПОДДЕРЖКИ БИОЛОГИЧЕСКОГО И ЛАНДШАФТНОГО РАЗНООБРАЗИЯ КРЫМА – ГУРЗУФ-97 КРЫМСКАЯ РЕСПУБЛИКАНСКАЯ АССОЦИАЦИЯ ЭКОЛОГИЯ И МИР РЕСПУБЛИКАНСКИЙ КОМИТЕТ АРК ПО ОХРАНЕ ОКРУЖАЮЩЕЙ ПРИРОДНОЙ СРЕДЫ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ АРК ТАВРИЧЕСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. В. И. ВЕРНАДСКОГО ЗАПОВЕДНИКИ КРЫМА – 2007 МАТЕРИАЛЫ IV МЕЖДУНАРОДНОЙ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ КОНФЕРЕНЦИИ, ПОСВЯЩЕННОЙ 10-ЛЕТИЮ ПРОВЕДЕНИЯ МЕЖДУНАРОДНОГО СЕМИНАРА ОЦЕНКА ПОТРЕБНОСТЕЙ СОХРАНЕНИЯ БИОРАЗНООБРАЗИЯ КРЫМА (ГУРЗУФ, ...»

«Серия Семейная энциклопедия А. Блейз ЭНЦИКЛОПЕДИЯ ПОЛЕЗНЫХ КОМНАТНЫХ РАСТЕНИЙ Москва ОЛМА-ПРЕСС 2000 ББК 53.59 Я2 Б 68 Исключительное право публикации книги А. Блейз Энциклопедия полезных комнатных растений принадлежит издательству ОЛМА-ПРЕСС. Выпуск произведения без разрешения издательства считается противоправ­ ным и преследуется по закону. Блейз А. Б 68 Энциклопедия полезных комнатных растений. — М.: ОЛМА-ПРЕСС, 2000. — 320 с. — (Семейная энциклопедия). ISBN 5-224-00712-7 Из данной ...»

«Российская академия сельскохозяйственных наук Государственное научное учреждение Всероссийский научно- исследовательский институт кормов имени В. Р. Вильямса Российской академии сельскохозяйственных наук ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ СЕЛЕКЦИЯ И СЕМЕНОВОДСТВО КЛЕВЕРА ЛУГОВОГО Результаты 25-летних исследований творческого объединения ТОС Клевер Москва 2012 УДК 633.321.2/.3:631.52.531.02 ББК 42.1 Э 40 Экологическая селекция и семеноводство клевера лугового. Резуль таты 25-летних исследований творческого ...»

«Нина Анатольевна Башкирцева Чистотел от ста болезней Издательство: Крылов, 2008г. ISBN 978-5-9717-0588-8 Введение Если вы услышите, как кто-то рекомендует делать примочки с настоем бородавника, попить желтушник или добавить в ванну отвар золотой травы, не торопитесь покупать в аптеке сразу три упаковки лекарственных трав. Ведь речь идет лишь об одном растении – чистотеле, который народ щедро наградил разными именами. Наверное, нет в нашей стране другого растения, чье название так красноречиво ...»

«У ВэйСииь Энциклопедия целебного чая. - СПб: Издательский Дом Нева, 2005.- 320 с: ил. ISBN 5-7654-4299-4 Новая книга профессора, доктора китайской медицины, академика У ВэйСиня рассказывает об истории культуры чая, о чайных традициях разных стран, а также о технологии производства различных типов чая (белого, зеленого, желтого, красного, черного). Автор описывает лечебные свойства чая и предлагает широкому кругу читателей тысячелетний опыт китайской медицины по применению чая. Предложенная ...»

«Г .Ф. ТАРАНОВ КОРМА И КОРМЛЕНИЕ ПЧЕЛ ИЗДАНИЕ ВТОРОЕ, ПЕРЕРАБОТАННОЕ И ДОПОЛНЕННОЕ МОСКВА РОССЕЛЬХОЗИЗДАТ 1986 ББК 46.91-4 TI9 УДК 638.1.4 ВВЕДЕНИЕ Рецензент — доктор биологических наук Г. А. Аветисян Таранов Г. Ф. Т19 Корма и кормление пчел.— 2-е изд., перераб. и доп.—М.: Россельхозиздат, 1986.— 160 с, ил. В книге приведены сведения об основных кормах пчел (нектаре, кеде, пыльце, перге и их заменителях), их химическом составе и фи* В отличие от большинства сельскохозяйственных жи зиологнческом ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Пермская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.Н. Прянишникова И.А. Самофалова ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ ПОЧВ И ПОЧВООБРАЗУЮЩИХ ПОРОД Допущено Учебно-методическим объединением вузов Российской Федерации по агрономическому образованию в качестве учебного пособия для студентов, обучающихся по специальностям 110101 Агрохимия и агропочвоведение и 110102 ...»

«РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК СИБИРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ ЦЕНТРАЛЬНЫЙ СИБИРСКИЙ БОТАНИЧЕСКИЙ САД НОВОСИБИРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ РУССКОГО БОТАНИЧЕСКОГО ОБЩЕСТВА СОВЕТ БОТАНИЧЕСКИХ САДОВ СИБИРИ И ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА — –“—“ –’— —— —–““‹ — –¬—… ‡ ‡ ¬ (‚· , 911 · 2009 „.) Новосибирск 2009 УДК 581.524 + 502.75(063) Проблема и стратегия сохранения биоразнообразия растительного мира Северной Азии: Материалы Всероссийской конференции (Новосибирск, 9–11 сентября 2009 г.). — Новосибирск: Изд-во Офсет, 2009.—288 с. ISBN ...»

«АГРОПРОМЫШЛЕННЫЙ КОМПЛЕКС: КОНТУРЫ БУДУЩЕГО (материалы Международной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых, г. Курск, 14-16 ноября 2012 г., ч. 3). Курск Издательство Курской государственной сельскохозяйственной академии 2012 УДК 338.43:001 (06) ББК 65.32:72я5 А25 А25 Агропромышленный комплекс: контуры будущего (материалы Международной научно-практической конференции студентов, аспиран тов и молодых ученых, г. Курск, 14-16 ноября 2012 г., ч. 3) [Текст]. – Курск: ...»

«АГРОПРОМЫШЛЕННЫЙ КОМПЛЕКС: КОНТУРЫ БУДУЩЕГО (материалы Международной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых, г. Курск, 14-16 ноября 2012 г., ч. 1). Курск Издательство Курской государственной сельскохозяйственной академии 2012 УДК 338.43:001 (06) ББК 65.32:72я5 А25 А25 Агропромышленный комплекс: контуры будущего (материалы Международной научно-практической конференции студентов, аспиран тов и молодых ученых, г. Курск, 14-16 ноября 2012 г., ч. 1) [Текст]. – Курск: ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Российский научно-исследовательский институт информации и технико-экономических исследований по инженерно-техническому обеспечению агропромышленного комплекса (ФГБНУ Росинформагротех) РЕЦИКЛИНГ ОТХОДОВ В АПК Справочник Москва 2011 УДК 628.4 ББК 36.91 Р 45 Рецензенты: Ю.А. Кузнецов, д-р техн. наук, проф., зав. кафедрой (Орловский государственный аграрный университет); В.И. Панферов, ...»






 
© 2013 www.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.